RFLP: DNA Gizemlerini Çözmede Tanım ve Kullanımları

Kısıtlama Parçacık Uzunluğu Polimorfizmi (RFLP), DNA'nın spesifik bölgelerinde kısıtlama enzim kesiminin benzersiz modellerine dayanılarak bireylerin tanımlanmasına olanak tanıyan moleküler bir moleküler yöntemdir.

Ayrıca RFLP Analizi olarak da adlandırılan teknik, kişilerin genetik kodlarındaki polimorfizmlerden yararlanmaktadır. Bir türün bütün üyeleri esasen aynı genetik yapıma sahip olsa da, bu hafif farklılıklar fenotipteki (görünüm veya metabolizma gibi) bireyler arasındaki farklılıkları açıklar.

Analiz Tekniği ve Uygulamaları RFLP analiz tekniği bilinen değişkenliğe sahip DNA'nın belirli bir bölgesini restriksiyon enzimleri ile kesmeyi ve daha sonra DNA fragmanlarını agaroz jel elektroforezi ile ayırmayı ve parçaları ve göreli boyutları.

Bir kısıtlama enzimi, sınırlama bölgelerinde DNA'yı kesen bir protein molekülü olan bir enzimdir. Özünde, DNA örneği parçalanır ve kısıtlama enzimleri tarafından sindirilir. Ortaya çıkan fragmanlar uzunluklarına göre ayrılır ve fragman boyutlarının modeli test edilen her birey için farklılık gösterecektir.

RFLP'nin tamamı, prob etiketleme, DNA parçalanması, elektroforez, lekeleme, hibridizasyon, yıkama ve otoradyografi gerektirir. Algılanan RFLP, bir otoradyografide X-ray filmi kullanılarak görselleştirilir; burada, DNA parçaları, elektroforez ile birbirlerinden ayrıldıktan sonra görüntülenebilir ve analiz edilebilir.

RFLP analizi için bazı başvurular şunları içerir:

DNA parmak izi alma

• Adli bilim adamları, suç mahallerinde toplanan kanıt örneklerine dayanarak şüphelileri belirlemek için RFLP analizini kullanabilir. Babalık. RFLP, babalık belirlemede veya soy atamada da kullanılır.
• Genetik çeşitlilik. Bu teknik, evrim ve yaban hayatı göçünün incelenmesi, hayvan popülasyonlarında üreme kalıplarının incelenmesi ve bazı hastalıkların tespiti ve teşhisinde kullanılabilir.
• Genomlarda RFLP varyasyonunun saptanması tekniği, genom haritalama ve genetik hastalık analizinde hayati bir araçtır.

Belirli bir hastalık geninin yeri belli bir kromozomda araştırılıyorsa araştırmacılar, bir ailenin DNA'sını hastalıkla analiz edip RFLP alellerinde benzer kalıtım kalıplarına bakarlar. Bir hastalık geni lokalize edildikten sonra, diğer aile üyeleri üzerinde RFLP analizi yapmak, mutant genlerin bir taşıyıcısını ortaya çıkarabilir veya genel hastalık riski sinyali verebilir.

Adli tıp biliminde ve diğer birçok alanda DNA analizi için daha yeni, daha sağlam teknikler kullanıldığı için RFLP tekniğinin yaygın olarak kullanılmadığına dikkat etmek önemlidir.

Analizin Negatif Boyutu

Ne yazık ki, RFLP analiz tekniği sıkıcı ve yavaştır. Büyük miktarda örnek DNA gerektirmekten başka, numunenin çoğunlukla DNA örnekleri için nispeten büyük olan bir çeyrek boyunda olması gerekecektir - prob etiketlemeden yıkama ve otoradyografiye kadar olan süreç, tamamlamak için tam ay.

İnsan Genomu Projesinden elde edilen sonuçlar, RFLP'ye olan ihtiyacı hemen hemen değiştirdi. Proje, insan hücrelerinde bulunan DNA dizisinin tamamının, insan genomunun belirlenmesine ve insan genomundaki tüm genlerin tanımlanmasına izin verdi.