Basit Bir Fosfat Tamponu Yapma Rehberi

Fosfat tamponlarını neden öne çıkarıyor? Öncelikle, üç asidik proton içerdiğinden, fosforik asit çoklu ayrışma sabitlerine sahiptir ve üç ilgili pH'ın herhangi biri için tamponlar oluşturmak için kullanılabilir.

Fosforik asid için üç pKa değeri (CRC El Kitabı, Kimya ve Fizik'ten) 2,16, 7,21 ve 12 dir. 32 Monosodyum fosfat ve konjuge baz, disodyum fosfat genellikle pH tamponları oluşturmak için kullanılır Burada gösterildiği gibi, biyolojik uygulamalar için 7 civarında değerler.

Bu arabellek üretmek, TAE ve TBE arabelleklerini yapmaktan biraz daha zor. Bununla birlikte, son derece zor değildir. Sadece ortalama. Bu tamponu kamçılamak yaklaşık 10 dakika alacaktır. İşte böyle.

1. Arabellek Özellikleri Üzerine Karar Verin

Bir arabellek oluşturmadan önce, hangi molarite olmasını istediğinizi, hangi hacmi yapacağınızı ve istenen pH değerini bilmeniz gerekir. Tamponların çoğu 0,1 M ile 10 M arasındaki konsantrasyonlarda en iyi sonuç verir. PH, asit / konjugat baz pKa'nın 1 pH birimi içinde olmalıdır. Basitlik açısından, bu numune hesaplaması 1 litrelik tampon için olacaktır.

2. Asidin Baz Oranını Belirleyin

Arzulanan pH'ın bir tamponu oluşturmak için baza asidin oranının ne olması gerektiğini belirlemek için Henderson-Hasselbalch denklemini kullanın (aşağıda). İstediğiniz pH'ya en yakın pKa değerini kullanın ve orantı o pKa'ya karşılık gelen asit-baz eşlenik çifti anlamına gelir.

HH Denklem: pH = 6.9, [Baz] / [Asit] = 0.4898

Bir tampon için pH = pKa + log ([Taban] / [Asit])

--3 ->

[Asit] yerine geçin ve [Baz]

için Çözün. Tamponun istenen molaritesi, [Asit] + [Baz] toplamıdır.

1 M tampon için, [Base] + [Acid] = 1 ve [Base] = 1 - [Acid]

Adım 2'deki oran denkleminin yerine getirerek: < [Asit] = 0.6712 mol / L

[Asit]

için çözme: [Taban] = 1 - [Asit] denklemini kullanarak şunu hesaplayabilirsiniz:

[Taban] = 0 3288 mol / L

3. Asit ve Konjuge Bazın Karıştırılması

Henderson-Hasselbalch denklemini, tampon için asit bazına ne oranı hesaplamak için kullandıktan sonra, doğru miktarda monosodyum fosfat ve disodyum fosfat kullanarak 1 litre solüsyonun altında hazırlayın .

4. PH değerini kontrol edin

Tampon için doğru pH değerine ulaşıldığını doğrulamak için bir pH probu kullanın. Fosforik asit veya sodyum hidroksit (NaOH) kullanarak hafifçe hafifçe ayarlayın.

5. Hacmi düzeltin

İstenilen pH'ya ulaşıldığında, tampon hacmini 1 litreye getirin. Daha sonra tamponu istediğiniz gibi sulandırınız. Bu aynı tampon, 0,5 M, 0,1 M, 0 05 M veya aradaki herhangi bir şey için tamponlar oluşturmak üzere seyreltilebilir.

6. Arabellek için İpuçları

pKa'nın kesin bir değere kolayca ölçülmediğini unutmayın.Literatürde farklı kaynaklardan biraz farklı değerler mevcut olabilir.

7. İhtiyacınız Olanlar

Tamponu oluşturmak için, üç madde gerekir; geri kalan malzemeler ekipmantır. Maddeler, pH'ı ayarlamak için monosodyum fosfat, disodyum fosfat ve fosforik asit veya sodyum hidroksittir.

Ayrıca bir pH metre, prob ve uygun laboratuar gereçlerine de ihtiyacınız olacak. Buna hacimsel bir şişe, kademeli silindirler, beherler ve karıştırma çubukları dahildir.

Son olarak, karıştırıcı bir ocak başlığına ihtiyacınız olacak.